超速離心沉降法簡(jiǎn)介
超速離心沉降法是指利用離心力的作用將分散體系中的分散質(zhì)點(diǎn)逐漸沉降,質(zhì)點(diǎn)越大,沉降速度越大,系基于沉降速度與分子量依賴性的原理來(lái)測(cè)定高聚物分子量分布的方法。由于高分子溶液中。高分子的質(zhì)量很小,需要超速離心機(jī),在很大的離心力場(chǎng)下才能觀察到它們的沉降[1] 。
超速離心沉降法離心機(jī)
離心機(jī)轉(zhuǎn)速可達(dá)每秒1000轉(zhuǎn)以上,得到幾十萬(wàn)倍于重力的離心力超速離心沉降法測(cè)量分子量分布是測(cè)定其沉降系數(shù),它的定義為粒子在單位離心加速度場(chǎng)中的沉降速率[2] 。
超速離心沉降法應(yīng)用
高速離心機(jī)、超速離心機(jī)在醫(yī)學(xué)生物領(lǐng)域里的實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院、大中院校、科研單位等用于分離細(xì)胞和細(xì)菌;純化和分離病毒、RNA、DNA、質(zhì)粒和蛋白質(zhì)等生物大分子[1] 。
超速離心沉降法離心過程注意事項(xiàng)
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1)離心轉(zhuǎn)頭的選用:離心中常用的是角轉(zhuǎn)子和水平轉(zhuǎn)子。角轉(zhuǎn)子常用來(lái)差速離心分離s(沉降系數(shù))值相差較大(1:10)的樣品。水平轉(zhuǎn)子常用于密度梯度和等密度離心。另有一種垂直轉(zhuǎn)子很少用,此轉(zhuǎn)子主要用于等密度離心,以縮短離心時(shí)間。??
2)離心管的選用:
①玻璃離心管不能在高、超速離心機(jī)上使用。
②PA管:化學(xué)性能穩(wěn)定,半透明,耐高溫消毒。
③PP管:化學(xué)性能穩(wěn)定,半透明,耐高溫消毒。
④PC管:透明度好,硬度大,能耐高溫消毒,但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿及某些有機(jī)溶劑,主要用于轉(zhuǎn)速5萬(wàn)/min以上離心。
⑤CN管:質(zhì)地較軟透明,但不耐強(qiáng)酸堿基某些有機(jī)溶劑,不耐高溫消毒,適合于蔗糖、甘油等密度梯度離心,因透明利于收集。
⑥離心管蓋子封閉性不夠好,液體就不能加滿(針對(duì)高速離心機(jī)且使用角轉(zhuǎn)子)以防外溢,失去平衡。外溢后果是污染轉(zhuǎn)子和離心腔,影響感應(yīng)器正常工作。
⑦超速離心時(shí),液體一定要加滿離心管,因?yàn)槌x需要抽高真空,只有加滿才能避免離心管變形[3] 。